TFA去除: 多肽轉換爲乙酸鹽形式

爲什麼(me)要去除TFA?

在多肽固相合成(chéng)過(guò)程中，三氟乙酸（TFA）經(jīng)常被(bèi)用來將(jiāng)多肽從固相樹脂上切割下來。在反相HPLC純化多肽的過(guò)程中，也會用到三氟乙酸或醋酸。但如果是用于臨床前和臨床研究中的多肽，殘留的三氟乙酸或氟化物將(jiāng)會是有毒的和不受歡迎的。

公司合成(chéng)的多肽一般都(dōu)是TFA鹽形式。如果殘留TFA會影響您的實驗，我們通常建議轉化爲其他鹽，如醋酸和鹽酸鹽形式。這(zhè)些鹽形式的多肽通常要比TFA鹽費用多20％至30％，這(zhè)是由于在轉鹽的過(guò)程中會損失部份多肽，而且需要更多的原材料。

TFA可能(néng)會帶來很多問題。因此，我們可以去除TFA鹽，從一開(kāi)始就避免他們。

TFA是一種(zhǒng)強酸。它可以質子化任何氨基。鹽酸也是這(zhè)樣(yàng)。在純化多肽過(guò)程中的反相HPLC，有一種(zhǒng)技術是陰離子交換。將(jiāng)多肽加載在柱子上，保持它在頂部，同時用足量的乙酸緩沖液洗滌，然後(hòu)用乙酸水溶液/乙腈作梯度洗脫。冷凍幹燥後(hòu)，抗衡離子TFA被(bèi)交換。該技術依賴于多肽的疏水性。一個親水性高的多肽將(jiāng)需要一個合适的陰離子交換樹脂。

澤溪源使用一種(zhǒng)特殊的反相C-18材料，提供了很好(hǎo)的分離法從而去除TFA。TFA、醋酸和氟化物的分離需用到由烷基季铵基團功能(néng)化的固定相。來自分析柱的洗脫液流經(jīng)suppressor，降低了洗脫液的總背景電導，增強了分析物離子的電導。通過(guò)抑制電導，信噪比比非抑制電導改善了約50倍。